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龙图腾网获悉陕西未来肉膳健康科技有限公司申请的专利一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118745413B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-29发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411023599.0，技术领域涉及：C12N5/077；该发明授权一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法是由周凤;包立辉;屈亚平;王卫华设计研发完成，并于2024-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及细胞培养技术领域，具体公开了一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法，将贴壁依赖型细胞接种于微载体在含有10％胎牛血清的DMEM培养基中进行细胞增殖，细胞增殖到10E6个mL后裂解微载体，离心并收集细胞团，细胞团接种于含有10％胎牛血清，0.1％剪切力保护剂，2gL葡萄糖的培养基中于30～50转min转速下培养3～4天，使细胞形成50μm～150μm类胚体团；机械吹打类胚体团，使其分散，用含有不同浓度梯度的低分子量葡聚糖硫酸钠的DMEM培养基驯化18～22天获得悬浮驯化成功的细胞系。本发明的方法提高了细胞类胚体的均一性，使类胚体性质更加稳定，能够高效获得悬浮细胞系。

本发明授权一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法在权利要求书中公布了：1.一种将贴壁细胞系驯化为全悬浮细胞系的方法，其特征在于，包括如下步骤： 将贴壁依赖型细胞接种于微载体在含有10％胎牛血清的DMEM培养基中进行细胞增殖，待细胞增殖到10E6个mL～12E6个mL后裂解微载体，离心并收集细胞团；所述贴壁依赖型细胞、微载体和含有10％胎牛血清的DMEM培养基的用量比为1.0E5个～1.0E6个：90mg～100mg：75mL～80mL； 收集的细胞团接种于培养基，于30转min～50转min转速下培养3天～4天，使细胞形成50μm～150μm类胚体团； 所述培养基含有体积分数8％～10％胎牛血清，质量分数0.05％～0.1％剪切力保护剂，1.8gL～2gL葡萄糖； 机械吹打类胚体团，使其分散，调整转速为50转min～70转min，于38℃～39℃、5％CO2条件下培养3d～4d后开始消化； 所述消化培养过程为： 第一阶段：每3天一次，使用温和型胰酶消化细胞类胚体，调整细胞密度为3E5个mL，转速为80转min，培养9天； 第二阶段：调整时间为每4天一次继续使用温和型胰酶消化细胞类胚体，培养12天； 第三阶段：然后将间隔时间调整为每5天一次，继续使用温和型胰酶消化细胞类胚体，培养15天； 每3～5天用温和型胰酶消化一次细胞类胚体，调整细胞密度为1E5个mL～6E5个mL，转速为70转min～90转min，消化培养30天～45天，将细胞类胚体分散成3～5个细胞组成的细胞团； 然后调整转速为90转min～110转min，用含有20gL～25gL葡萄糖及240mgL～250mgL低分子量葡聚糖硫酸钠的DMEM培养基，监控葡萄糖含量，低于1gL时离心换液，每次换液时重新调整细胞密度为1E5～6E5个mL，筛选出能够适应悬浮环境并正常增殖的细胞群体； 梯度降低DMEM培养基中低分子量葡聚糖硫酸钠浓度：分别配制获得含有浓度200mgL、150mgL、100mgL、50mgL、25mgL、10mgL、0mgL低分子量葡聚糖硫酸钠的DMEM培养基； 按照浓度梯度从高到低依次换液培养，驯化18天～22天获得悬浮驯化成功的细胞系。

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