西宝生物科技(上海)股份有限公司;泉养堂(江苏)生物医药有限公司刘思国获国家专利权
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龙图腾网获悉西宝生物科技(上海)股份有限公司;泉养堂(江苏)生物医药有限公司申请的专利一种GLP-1类似物的生物发酵制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120005002B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510503401.7,技术领域涉及:C07K14/605;该发明授权一种GLP-1类似物的生物发酵制备方法及其应用是由刘思国;陈立军;朱凯伦;葛文斌;张广华设计研发完成,并于2025-04-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种GLP-1类似物的生物发酵制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种GLP‑1类似物的生物发酵制备方法及其应用,方法步骤如下:合成GLP‑1类似物的编码基因,并引入串联接口;利用接口,将编码基因串联成8个拷贝,并构建表达载体;将表达载体转染受体菌,筛选获得表达菌株;规模培养表达菌株,获得GLP‑1类似物八聚体包涵体;纯化包涵体,获得GLP‑1类似物八聚体;酶解GLP‑1八聚体,形成GLP‑1类似物单体;去除单体中的高分子量蛋白,纯化获得GLP‑1纯品。本发明用药安全性高,提高了体内半衰期,促进包涵体的形成。降低重组表达难度,提高表达量;克服使用过长聚体带来的问题以及过少聚体不易形成包涵体等问题。提高了纯度,降低了杂质干扰。
本发明授权一种GLP-1类似物的生物发酵制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种GLP-1类似物的生物发酵制备方法,其特征在于所述方法步骤如下: S1.合成GLP-1类似物的编码基因,并在其两端引入串联接口,所述串联接口的结构为:E1-E2-[GLP-1类似物编码基因]-E3-E4,其中E1为EcoRI,E2为BglII,E3为BamHI,E4为HindIII; S2.利用串联接口,将GLP-1类似物的编码基因限定间隔序列为Gly-Ser-Met-Arg后串联成8个拷贝,并构建表达载体; S3.将8个拷贝GLP-1类似物表达载体转染大肠杆菌OrigamiBDE3pLysS,筛选获得表达菌株; S4.规模培养表达菌株,表达获得GLP-1类似物八聚体包涵体; S5.在变性条件下,通过层析方法纯化包涵体,获得GLP-1类似物八聚体; S6.利用梭菌蛋白酶酶解GLP-1八聚体,形成GLP-1类似物单体,所述GLP-1类似物单体由下述通式表示,通式为 HGX1GTFTSDVSSYLEGQAAKEFIX2WLVKGR,其中X1为Glu;X2为Gly; S7.通过超滤方法去除GLP-1类似物单体中的高分子量蛋白,再用制备型HPLC纯化获得GLP-1纯品。
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