中国热带农业科学院三亚研究院;海南阡陌纵横农业开发有限公司赵辉获国家专利权
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龙图腾网获悉中国热带农业科学院三亚研究院;海南阡陌纵横农业开发有限公司申请的专利采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120060556B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510529803.4,技术领域涉及:C12Q1/6895;该发明授权采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法是由赵辉;夏启玉;张丽丽;刘善会;郭献普;许彬;张晓君;胡帅;杜晓希;张金鑫;董晓静设计研发完成,并于2025-04-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法,属于生物技术领域,所述方法是以RA1基因作为内参基因,以Hyg筛选标记基因作为外源基因,利用引物对RA1‑FRA1‑R和引物对Hyg‑FHyg‑R,检测转基因狗尾草或转基因谷子的基因组DNA,并判断转基因狗尾草或转基因谷子中外源基因插入拷贝数。本发明提供了采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法,具有简单快速、样本用量低、高效、高通量等特点,能够提高筛选低拷贝插入的狗尾草或谷子转基因株系的效率,为转基因狗尾草或转基因谷子研究中外源基因插入拷贝数的检测方法提供新的选择。
本发明授权采用荧光定量PCR或数字PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法在权利要求书中公布了:1.一种采用荧光定量PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法,其特征在于,所述采用荧光定量PCR检测狗尾草或谷子中外源基因插入拷贝数的方法是以RA1基因作为内参基因,以Hyg筛选标记基因作为外源基因,利用引物对RA1-FRA1-R和引物对Hyg-FHyg-R,荧光定量PCR检测转基因狗尾草或转基因谷子的基因组DNA,并判断转基因狗尾草或转基因谷子中外源基因插入拷贝数; 检测内参基因RA1的引物对序列: 正向引物RA1-F如SEQIDNO:1所示; 反向引物RA1-R如SEQIDNO:2所示; 检测Hyg筛选标记基因的引物对序列: 正向引物Hyg-F如SEQIDNO:3所示; 反向引物Hyg-R如SEQIDNO:4所示; 采用荧光定量PCR检测过程中,转基因狗尾草或转基因谷子中外源基因插入拷贝数的判断方法为: 外源基因的相对拷贝数为0.26~0.74时,转基因狗尾草或转基因谷子为单拷贝插入; 外源基因的相对拷贝数为0.75~1.25时,转基因狗尾草或转基因谷子为双拷贝插入; 外源基因的相对拷贝数为1.26~1.74时,转基因狗尾草或转基因谷子为三拷贝插入; 外源基因的相对拷贝数为1.75~2.25时,转基因狗尾草或转基因谷子为四拷贝插入; 以此类推转基因狗尾草或转基因谷子的其它插入拷贝数。
如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国热带农业科学院三亚研究院;海南阡陌纵横农业开发有限公司,其通讯地址为:572000 海南省三亚市崖州区创意产业标准厂房二期三楼235区;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。
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