山东见微生物科技有限公司高青获国家专利权
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龙图腾网获悉山东见微生物科技有限公司申请的专利一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120099151B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510585195.9,技术领域涉及:C12Q1/6851;该发明授权一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液及其制备方法是由高青;王义翠;曹玉峰;张怀勇;赵世鹏;孙悦;许广芳设计研发完成,并于2025-05-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液及其制备方法,涉及生化试剂技术领域,其中,所述缓冲液包括Tris‑HCl、NH42SO4、KCl、温控型镁离子纳米胶囊、添加剂;所述添加剂为聚乙二醇、甜菜碱、海藻糖、氯化四甲基铵、乙酰化的BSA;所述温控型镁离子纳米胶囊为核壳结构,所述核包括占所述缓冲液浓度为1mM‑5mM的MgCl2、0.1‑0.5UμL的焦磷酸酶、10‑30mgmL的磷脂、5‑15mgmL的胆固醇、无机溶液,所述壳包括占所述缓冲液浓度为20‑45wt%的温敏型聚合物。本发明的缓冲液能够动态调节Mg2+浓度,避免因Mg2+浓度难以调节影响扩增效率。
本发明授权一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种支持多重荧光定量PCR的缓冲液,其特征在于,所述缓冲液包括10mM-20mMTris-HCl、15mM-30mMNH42SO4、50mM-100mMKCl、0.5-1.0mgml温控型镁离子纳米胶囊、添加剂; 所述添加剂包括占所述缓冲液浓度为5-10%vv聚乙二醇、0.8M-1.2M的甜菜碱、0.5M-1.0M的海藻糖、15mM-40mM的氯化四甲基铵、0.1-0.5mgmL的乙酰化的BSA; 所述温控型镁离子纳米胶囊为核壳结构,所述核包括占所述缓冲液浓度为1mM-5mM的MgCl2、0.1-0.5UμL的焦磷酸酶、10-30mgmL的磷脂、5-15mgmL的胆固醇、氯仿或甲醇或氯仿与甲醇质量比为3:1的混合液,所述壳包括占所述缓冲液浓度为20-40wt%的温敏型聚合物,所述温敏型聚合物为聚N-乙烯基己内酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺、聚甲基乙烯基醚中的任意一种; 所述温控型镁离子纳米胶囊的制备步骤如下:将磷脂与胆固醇溶于氯仿或甲醇或氯仿与甲醇质量比为3:1的混合液中,旋转蒸发形成均匀脂质薄膜,用MgCl2和焦磷酸酶的混合液水化脂质薄膜,震荡离心,获得单层脂质体,将温敏型聚合物溶于在3-5℃预冷的PBS溶液中,磁力搅拌至完全溶解,将脂质体与温敏型聚合物溶液按质量比1:2混合,在3-5℃孵育2-3h,离心纯化得到温控型镁离子纳米胶囊。
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