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龙图腾网获悉北京中医药大学申请的专利一种高尔基体体外培养方法及其在构建药物毒性筛选系统中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116478905B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-22发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310165976.3，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权一种高尔基体体外培养方法及其在构建药物毒性筛选系统中的应用是由李晓骄阳;刘闰平;曲姣蓉;丁明宁;孙蓉;吴建芝;龚立平;刘佳;杜航;吴恺怿;沈显辉设计研发完成，并于2023-02-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高尔基体体外培养方法及其在构建药物毒性筛选系统中的应用在说明书摘要公布了：本发明属于药物筛选和生物医药技术领域，具体涉及一种高尔基体体外培养方法及其在构建药物毒性筛选系统中的应用。具体的，本发明通过改进ATP再生缓冲体系并摸索合适的细胞质基质—高尔基体配比，利用蛋白免疫印迹及免疫荧光技术测定该体系下高尔基体功能相关标志物的表达，证实了在该体系下高尔基体的活性维持状态良好，并基于此培养系统进一步构建了包括雷公藤甲素等在内的多种肝毒性药物的毒效及敏感性评价平台系统。本发明极大降低高尔基体体外培养难度，缩短操作时间且可重复性强。从功能学水平反映药物肝毒性对细胞器的损伤状况，进而用于更广泛的微观层次的药物毒性及敏感性评价，因此具有良好的实际应用之价值。

本发明授权一种高尔基体体外培养方法及其在构建药物毒性筛选系统中的应用在权利要求书中公布了：1.一种高尔基体体外培养方法，其特征在于，所述培养方法包括利用自体原代细胞通过五次不同转速的离心分离提取高尔基体，向其中加入细胞质基质溶液，从而完成高尔基体和细胞质基质组装，进而向其中加入ATP支持系统溶液； 所述细胞质基质溶液取自与高尔基体同一组织来源； 所述高尔基体和细胞质基质溶液中总蛋白质量比为1：20-30； 所述ATP支持系统溶液包含磷酸肌酸、ATP、细胞松弛素B和肌酸激酶； 所述细胞质基质溶液其制备方法如下：将经预处理后的非人动物的肝脏组织破碎后加入柠檬酸钠缓冲液进行匀浆处理，然后将混合液进行离心，取上清液后进行超高速离心，取上清液即得； 所述肝脏组织预处理方法包括：将生理盐水灌注至肝脏中，直至肝脏血管中血液被完全置换，肝发黄白色且无明显血块淤积则为灌流完成； 离心处理具体条件为5000-20000g条件下离心10-30分钟； 所述超高速离心处理具体条件为90000-200000g条件下离心30-120分钟； 所述ATP支持系统溶液具体成分组成如下：100mM磷酸肌酸、1mMATP、0.2mgml细胞松弛素B以及0.2mgml肌酸激酶； 所述培养方法还包括向其中加入缓冲溶液或含待测药物的缓冲溶液，所述缓冲溶液包括：10-100mM的Tris-HCl、0.1-0.5M蔗糖、10-100mM氯化钾、10-50mMβ甘油磷酸盐、10-30mMEGTA、5-20mM氯化镁、1-5mMATP、0.5-2mMGTP、0.5-2mM谷胱甘肽。

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