大连理工大学;大连理工大学宁波研究院康巍获国家专利权
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龙图腾网获悉大连理工大学;大连理工大学宁波研究院申请的专利一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系及其构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117253547B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311103996.4,技术领域涉及:G16B30/20;该发明授权一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系及其构建方法是由康巍;刘春雪;薛闯;马骁设计研发完成,并于2023-08-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系及其构建方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系及其构建方法,属于基因工程及生物工程技术领域。本发明以Mi3作为支架蛋白,通过基因融合的方式在支架蛋白上连接FKBP短肽,对Mi3外表面进行修饰加工,获得一种响应雷帕霉素刺激的Mi3chem;同时利用小分子雷帕霉素介导FK506结合蛋白FKBP和FRB非共价键异二聚化的性质,在添加雷帕霉素的情况下,实现Mi3chem上招募带有FRB标签的货物蛋白,在胞外和胞内构建的蛋白质笼都有较好的招募效果。本发明实现了对目的蛋白进行可控的招募过程,为高效生产提供了新思路及新途径。
本发明授权一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系及其构建方法在权利要求书中公布了:1.一种基于人工蛋白质笼的可控蛋白招募体系的构建方法,其特征在于,主要包括以下步骤: 1将蛋白质笼Mi3亚基的基因片段与FK506结合蛋白的基因片段通过柔性链接序列连接,得到可表达FKBP-Mi3的重组基因片段,插入到质粒载体中,构建能够在宿主细胞中表达蛋白质笼Mi3chem的质粒,转化入宿主细胞中,培养并诱导表达后,分离纯化获得蛋白质笼Mi3chem; 2将FRB结构域的基因片段与目的蛋白的基因片段通过柔性链接序列连接,得到可表达带有FRB结构域的目的蛋白分子的重组基因片段,插入到质粒载体中,构建能够在宿主细胞中表达带有FRB结构域的目的蛋白分子的质粒,转化入宿主细胞中,培养并诱导表达后,分离纯化获得带有FRB结构域的目的蛋白分子; 3将步骤1得到的蛋白质笼Mi3chem与步骤2得到的带有FRB结构域的目的蛋白分子进行混合,随后添加2-20μM雷帕霉素进行可控招募,通过尺寸排阻色谱分离获得可控蛋白招募体系。
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