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龙图腾网获悉河北省林业和草原科学研究院申请的专利一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119138329B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411538092.9，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法是由赵玉芬;林艳;李金霞;刘易超;史丽娟设计研发完成，并于2024-10-31向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括胚珠接种、愈伤组织诱导及筛选、芽诱导及增殖、壮苗培养、生根诱导以及炼苗移栽步骤。本发明通过采用水解酪蛋白营养支撑、动态激素调控、芽丛状增殖、壮苗态生根、瓶内炼苗与瓶外炼苗相结合、移栽基质改进等方法，为提高仙客来组培接种成活率及出苗成活率提供了有效的新途径。

本发明授权一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法在权利要求书中公布了：1.一种以胚珠为外植体的仙客来组培繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1：胚珠接种 步骤1-1：取欲繁殖的仙客来优良单株未开放或半开放的花蕾，摘除花瓣留下子房；用流动的自来水将子房冲洗2小时以上，在超净工作台上对其进行清洗消毒后置于解剖镜下，用解剖刀将胚珠剥离胎座； 步骤1-2：用解剖刀或镊子沾取胚珠，接入愈伤组织诱导培养基，密封； 所述愈伤组织诱导培养基的配方为：12MS培养基+2,4D2.0mgL+2iP0.8mgL+水解酪蛋白500mgL+糖30gL+琼脂6gL，pH值为5.8-6.0； 步骤2：愈伤组织诱导及筛选 将接有胚珠的愈伤组织诱导培养基置于22-25℃完全黑暗的环境中连续培养3-5个月诱导其产生愈伤组织；其中，在愈伤组织诱导培养过程中，每4周筛选致密、乳黄色或乳白色愈伤组织转接种一次； 步骤3：芽诱导及增殖 步骤3-1：待连续黑暗培养愈伤组织3-5个月后，筛选致密、乳黄色或乳白色的愈伤组织转接至分化培养基上进行芽诱导培养，得到不定芽； 步骤3-2：在不定芽增殖初期，筛选致密、出不定芽球多的愈伤组织作为增殖器官转接至增殖培养基进行增殖培养； 步骤3-3：在不定芽增殖过程中，筛选至少含有3个芽点的芽丛进行继代培养；所述芽丛基部根据增殖培养基空间留有愈伤组织； 步骤3-4：根据芽丛以及芽丛基部留有的愈伤组织的发育情况，不断重复步骤3-2和3-3，获得更多基部留有愈伤组织的芽丛； 所述分化培养基和增殖培养基的配方相同，为：12MS培养基+6-BA0.5～2.0mgL+NAA0.05～0.2mgL+水解酪蛋白100mgL+糖30gL+琼脂6gL； 其中，增殖培养基中6-BA的浓度根据芽丛增殖情况及叶柄、叶片生长情况在其原有基础上进行动态调节，当芽丛幼嫩芽过多，愈伤组织出现透明现象时，降低6-BA浓度；当芽丛基部留有的愈伤组织分化芽点过少、愈伤组织出现褐化时，升高6-BA浓度； 步骤4：壮苗培养 对步骤3分化增殖得到的芽丛进行修剪，使芽丛保留6个以上均匀分布的叶柄，并且基部留有愈伤组织，之后将芽丛转入壮苗培养基进行1~2代的壮苗培养，得到无根试管苗； 所述壮苗培养基配方：12MS培养基+6-BA0.05~0.2mgL+NAA0.01mgL+水解酪蛋白100mgL+糖30gL+琼脂6gL； 步骤5：生根诱导 壮苗培养结束后，对健壮的无根试管苗进行修剪，使芽丛上的芽点分布均匀，芽丛基部留有愈伤组织，然后转接至生根培养基中培养30-45天，得到生根瓶苗； 所述生根培养基配方：12MS培养基+NAA0.5～1.0mgL+IBA0.5～1.0mgL； 步骤6：炼苗移栽 步骤6-1：将已生根的瓶苗，置于强自然光下炼苗5-7天之后进行移栽；同时，于移栽前2-3天，将装有已生根瓶苗的瓶盖旋松并露出缝隙，使瓶苗透气进行炼苗； 步骤6-2：瓶内炼苗完成后，取出已生根的瓶苗，将其基部培养基洗净，并移栽至铺有移栽基质的穴盘或泡沫箱中；移栽初期15天内，用塑料薄膜覆盖保持湿度85%以上，并控制光照强度小于6000lux，之后逐渐撤去塑料薄膜直至置于自然条件下； 步骤6-3：待苗木铺满穴盘或长满泡沫箱后，将其移栽至营养钵中，进行常规管理。

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