徐轶冰;林楷获国家专利权
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龙图腾网获悉徐轶冰;林楷申请的专利一种促使MSC分化为少突胶质前体细胞的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116144595B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310210875.3,技术领域涉及:C12N5/079;该发明授权一种促使MSC分化为少突胶质前体细胞的方法是由徐轶冰;林楷设计研发完成,并于2023-03-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种促使MSC分化为少突胶质前体细胞的方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种促使间充质干细胞MSC分化为少突胶质前体细胞的方法,包括将分离的MSC原代培养、二次传代培养后,以含有“少突胶质前体细胞分化关键基因”的基因表达载体进行处理,再采用“少突胶质前体细胞分化培养基”进行分化培养。本发明通过特定细胞分化处理和培养工艺,使用经过重组人层粘连蛋白处理的细胞培养基质,对MSC进行培养、促使其分化,在较短时间内获得MSC来源少突胶质前体细胞。本发明进一步提供了一种高效收获少突胶质前体细胞的方法,具体通过一种限速摇动方法,收获少突胶质前体细胞并允许进一步增殖,可以在短时间内收获较大量且纯度较高的少突胶质前体细胞,用于生产细胞治疗产品。
本发明授权一种促使MSC分化为少突胶质前体细胞的方法在权利要求书中公布了:1.一种促使间充质干细胞分化为少突胶质前体细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)分离间充质干细胞,原代培养; (2)将原代培养后的间充质干细胞传代接种于细胞培养基质表面,添加细胞培养基,进行第一次传代培养,所述细胞培养基质经过“促进细胞贴壁”处理; (3)将第一次传代培养后的间充质干细胞再次传代接种于细胞培养基质表面,添加细胞培养基,进行第二次传代培养,所述细胞培养基质未经过“促进细胞贴壁”处理; (4)对第二次传代培养后的间充质干细胞,以含有“少突胶质前体细胞分化关键基因”的基因表达载体进行处理,其后再次传代接种于细胞培养基质表面,添加“少突胶质前体细胞分化培养基”进行分化培养,完成少突胶质前体细胞分化,所述细胞培养基质经过“促进细胞贴壁”以及“重组人层粘连蛋白”处理; 步骤(4)所述的“少突胶质前体细胞分化关键基因”的基因表达载体含有的基因包括Olig2和Sox10; 步骤(4)所述的以含有“少突胶质前体细胞分化关键基因”的基因表达载体进行处理的具体步骤为:将第二次传代培养后的间充质干细胞以细胞悬液状态进行质粒载体转染,每1×106个细胞电转5~10μgOlig2和5~10μgSox10质粒; 所述“少突胶质前体细胞分化培养基”包括以下成分组成:非必需氨基酸0.1~5%、胰岛素0.1~10μgmL、全铁转铁蛋白2~100μgmL、腐胺5~200μgmL、人血白蛋白250~4000μgmL、超氧化物歧化酶1~10μgmL、谷胱甘肽0.1~10μgmL、黄体酮1~10ngmL、视网醇0.01~2μgmL、维生素A0.01~2μgmL、dl-α-生育酚乙酸酯0.1~10μgmL、维生素E0.1~10μgmL、亚油酸0.1~10μgmL、α-亚麻酸0.1~10μgmL、硫辛酸1~10ngmL、bFGF0.5~10ngmL、PDGF-AA0.5~10ngmL。
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