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龙图腾网获悉中国人民解放军海军特色医学中心申请的专利一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法及模型评价获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116584440B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310670864.3，技术领域涉及：A01K67/02；该发明授权一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法及模型评价是由刘飞;唐瑛;陈思洁;廖昌波;焦勇;方立本设计研发完成，并于2023-06-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法及模型评价在说明书摘要公布了：本发明公开了一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法及模型评价，所述步骤如下：步骤一：金黄色葡萄球菌的体外标记；步骤二：金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的建立，通过采用暴露气管，小鼠气管内定量气溶胶雾化装置经口气管雾化给菌的方式，使小鼠吸入的量能够控制在同一水平，各组误差较小，造模质量较高；操作难度较小，能够有效提高造模成功率，对动物的损伤较小通过近红外成像系统活体观察小鼠肺部成像情况，观察到小鼠肺部有明显均匀的近红外荧光图像即为造模成功，能够第一时间知道模型是否建立成功，避免了滞后性，且该评价方法不需要进行一系列的有创操作提取样本，以及后续系列检测，方法操作简单，时间较短。

本发明授权一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法及模型评价在权利要求书中公布了：1.一种制备金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的方法，其特征在于：步骤如下： 步骤一：金黄色葡萄球菌的体外标记；所述金黄色葡萄球菌的体外标记包括以下步骤： a：菌株及细菌培养；所述菌株及细菌培养步骤包括如下： S1：活化，将-80℃--90℃冰箱保存的金黄色葡萄球菌的甘油菌种化冻后，使用接种环接种于琼脂培养皿中，37℃-45℃培养过夜； S2：预培养，将步骤S1得到的菌液以1:100（vv）接种到30ml新鲜的NB液体培养基中，在37℃-45℃，250rpm下培养6h-10h，直到达到OD600为0.8； S3：正式培养：将S2得到的菌液以1:100（vv）接种到30ml新鲜的NB液体培养基中，在37℃-45℃，250rpm下培养4h，直到达到OD600为0.6； S4：菌液OD调整，收集S3得到的1mL菌液至无菌EP管中，4000rpm离心10min集菌，弃培养基上清液，用PBS清洗3-4次，转速为4000rpm，时间10-15分钟，温度25°C-30°C，后用PBS调整菌液浓度约为2×108CFUml细菌溶液； b：近红外荧光染料及细菌标记，所述近红外荧光染料为氨基水溶性量子点，激发及发射波长为650±20nm；所述细菌标记方法为向浓度为2×108CFUml细菌溶液中加入2μgml量子点染料，将菌液冰浴10-15分钟，42℃水浴90秒，然后立即冰浴2分钟，再置于37℃-45℃恒温恒湿培养箱中培养60分钟，培养结束后，4000rpm离心6分钟，弃去上清液，用PBS清洗3-5次转速为4000rpm，时间10-15分钟，温度25°C-30°C，再用1mlPBS重新悬浮； 步骤二：金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的建立；所述金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的实验动物为BALBc雄性小鼠30只，体重20-22g，实验小鼠喂养在海军特色医学中心动物房，饲养环境室内相对湿度为50%-60%，温度控制在18-22°C；常规饲料喂养，自由饮用水，按时通风冲刷粪便，保持环境安静，适应性喂养1-2周后开始实验； 所述金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型的建立还包括对实验动物进行接种细菌，采用暴露气管，小鼠气管内定量气溶胶雾化装置经口气管雾化给菌的方式； 所述接种细菌方法为： a：采用戊巴比妥钠麻醉小鼠，将小鼠呈仰卧位固定于操作台上，切开颈部皮肤，游离气管，用皮筋挂住小鼠门牙，用镊子轻轻拉出小鼠舌头； b：待拉出小鼠舌头之后，左手持喉镜，自小鼠上唇齿伸入口腔，伸至鼠会厌缘处调整角度直至可清晰看到声门裂为宜； c：右手持预先定量装入近红外荧光标记金黄色葡萄球菌的小鼠气管内定量气溶胶雾化装置，将气溶胶雾化喷射头插入气管15-20mm，提拉气管，确定针头是否准确插入气管，随后迅速推注50μl金黄色葡萄球菌菌液； d：推注完毕后，缝合伤口，空白组不做处理，盐水对照组推入同等量的无菌生理盐水； 将造模好的小鼠放入小动物活体成像仪中，通过近红外成像系统活体观察小鼠肺部成像情况，观察到小鼠肺部有明显均匀的近红外荧光图像即为造模成功。

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