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龙图腾网获悉中国医学科学院医药生物技术研究所申请的专利一种过表达MR-1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117467701B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311260006.8，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权一种过表达MR-1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法是由赵午莉;邵荣光;蔡美莲设计研发完成，并于2023-09-27向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种过表达MR-1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种过表达MR‑1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法，所述方法包括以下步骤：步骤一、PNKD基因敲入模式小鼠构建；步骤二、cKP小鼠的获得；步骤三、步骤二的cKP小鼠和步骤一的PNKD基因敲入小鼠交配；步骤四、用他莫昔芬诱导基因型改变；步骤五：检测。

本发明授权一种过表达MR-1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法在权利要求书中公布了：1.一种过表达MR-1转基因肺腺癌小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 步骤一、PNKD基因敲入模式小鼠构建； 步骤二、cKP小鼠的获得； 步骤三、步骤二的cKP小鼠和步骤一的PNKD基因敲入小鼠交配； 步骤四、用他莫昔芬诱导基因型改变； 其中步骤一、PNKD基因敲入模式小鼠构建，步骤如下： 1sgRNA设计和载体构建：根据靶位点区域的设计原则，设计Cas9sgRNA并将sgRNA连入带有T7启动子的质粒载体中，进行体外转录，通过酶切鉴定和测序确认打靶载体的构建完成； 2小鼠受精卵注射：将Cas9sgRNA打靶载体进行显微注射到小鼠受精卵中，以构建PNKD基因敲入小鼠； 3F0代鼠尾基因型鉴定和交配：从F0小鼠中选择基因型鉴定结果为阳性的小鼠与野生型小鼠进行交配，以获得具有稳定基因型的F1代小鼠； 4F1代小鼠基因型鉴定和表达检测：对F1代小鼠进行基因型鉴定，可以使用RT-PCR和Southernblot技术对PNKD基因的表达进行检测，筛选出具有稳定基因型的F1代小鼠，然后进行留种繁殖，以获得PNKD过表达转基因的F1代小鼠； 步骤二、cKP小鼠的获得，步骤如下： 将sftpc-CreERT2小鼠和KrasLSL-G12D-Trp53LSL-R172H小鼠进行交配，获得了含有sftpc-CreERT2和KrasLSL-G12D-Trp53LSL-R172H基因的小鼠，cKP小鼠； 步骤三、步骤二的cKP小鼠和步骤一的PNKD基因敲入小鼠交配，步骤如下： 将cKP小鼠和PNKD基因敲入小鼠进行交配，以获得同时具有sftpc-CreERT2、KrasLSL-G12D-Trp53LSL-R172H和PNKD基因的小鼠； 步骤四、用他莫昔芬诱导基因型改变，步骤如下： 将他莫昔芬腹腔注射到步骤三得到的小鼠，连续注射5天，每天一次。

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