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天津大学汪光义获国家专利权

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龙图腾网获悉天津大学申请的专利一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117683646B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311712718.9,技术领域涉及:C12N1/15;该发明授权一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法是由汪光义;朱星宇设计研发完成,并于2023-12-13向国家知识产权局提交的专利申请。

一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法,包括破囊壶菌基因组序列获取及功能注释;已知模式生物内源还原甘氨酸固碳途径酶氨基酸序列的获取;已知模式生物内源还原甘氨酸固碳途径酶氨基酸序列与破囊壶菌氨基酸序列的多序列相似性比对;破囊壶菌还原甘氨酸固碳途径相关酶氨基酸序列的保守结构域分析;破囊壶菌还原甘氨酸固碳途径的功能鉴定;破囊壶菌乙酰辅酶a合成相关基因的表达;破囊壶菌实验室适应性进化;破囊壶菌高值次生代谢产物的13C同位素示踪检测。本方法可快速鉴定破囊壶菌菌株的固碳潜力并通过基因编辑结合适应性进化策略,实现破囊壶菌利用来自甲酸及CO2的碳原子参与高值次生代谢产物的生物合成。

本发明授权一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法在权利要求书中公布了:1.一种固碳破囊壶菌菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤: 1获取破囊壶菌的基因组序列、编码基因及氨基酸序列并进行功能注释: 通过对破囊壶菌进行基因组测序后所得到的初始测序数据进行去接头、数据过滤、基因组survey分析、基因组组装及注释获得其基因组序列、所有编码基因、氨基酸序列及注释信息; 2已知模式生物内源还原甘氨酸途径酶氨基酸序列的获取: 通过Genbank数据库搜检索出内源还原甘氨酸固碳途径酶氨基酸序列; 3已知模式生物内源还原甘氨酸途径酶氨基酸序列与破囊壶菌氨基酸序列的多序列相似性比对: 利用BLAST软件将每个已知模式生物内源还原甘氨酸固碳途径酶氨基酸序列对破囊壶菌所有氨基酸序列进行多序列比对分析; 其中,已知模式生物为酿酒酵母; 4破囊壶菌内源还原甘氨酸固碳途径相关酶氨基酸序列的保守结构域分析: 使用NCBIconserveddomainsearch软件对预测出的破囊壶菌内源还原甘氨酸途径相关酶氨基酸序列进行结构域功能分析; 5破囊壶菌内源还原甘氨酸固碳途径的功能鉴定: 在破囊壶菌培养基中添加13C标记的甲酸及碳酸氢钠,培养2代后裂解细胞,取上清液进行液相色谱质谱联用检测细胞中甘氨酸是否携带13C标记的甲酸及碳酸氢钠碳原子; 6破囊壶菌乙酰辅酶a合成相关基因的表达: 将丝氨酸羟甲基转移酶基因、丝氨酸脱氨酶基因、甘氨酸还原酶基因、磷酸乙酰转移酶基因、乙酸激酶和乙酰辅酶a合成酶基因在破囊壶菌TWZ-97中分别过表达,获取工程菌株; 7破囊壶菌实验室适应性进化: 将上述步骤获得的破囊壶菌工程菌株于进化M4发酵培养基中连续传代培养,其中进化M4发酵培养基的配方如下:葡萄糖60gL,酵母提取物15gL,磷酸二氢钾0.25gL,人工海盐33gL,甲酸钠500mM,碳酸氢钠100mM,PH为7.0; 8破囊壶菌高值次生代谢产物的13C同位素示踪检测: 在破囊壶菌培养基中添加13C标记的甲酸及碳酸氢钠,培养2代后裂解细胞,取上清液进行液相色谱质谱联用检测细胞中二十二碳六烯酸和角鲨烯是否携带13C标记的甲酸及碳酸氢钠碳原子。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人天津大学,其通讯地址为:300072 天津市南开区卫津路92号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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