宁波大学程鹏飞获国家专利权
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龙图腾网获悉宁波大学申请的专利一种微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119606919B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510152785.2,技术领域涉及:A61K9/50;该发明授权一种微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法及其应用是由程鹏飞;何其霖;邱晓挺;张金荣;严小军设计研发完成,并于2025-02-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种微藻外泌体‑岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法及其应用,特点是包括以下步骤:将岩藻黄素乙醇溶液与微藻外泌体溶液按质量比0.5‑1.5:1的比例加入到比色皿中共孵育30min后,加入混合液1‑3倍体积的电转缓冲液,接着使用电穿孔仪对比色皿中的混合液进行电穿孔,控制电压为100‑500V,电容为300‑700μF进行电击,然后在35‑40℃下孵育0.5‑2h后,将混合液在80000‑120000g,4℃条件下离心20‑40min,收集沉淀颗粒,即得到微藻外泌体‑岩藻黄素复合纳米颗粒,该复合纳米颗粒在制备抗氧化剂、ABTS自由基清除剂和或DPPH自由基清除剂中的应用,优点是提高岩藻黄素稳定性及生物利用度,且产生协同抗氧化效应。
本发明授权一种微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒的制备方法,其特征在于包括以下步骤:将岩藻黄素乙醇溶液与微藻外泌体溶液按质量比0.5-1.5:1的比例加入到比色皿中共孵育30min后,加入混合液1-3倍体积的电转缓冲液,接着使用电穿孔仪对比色皿中的混合液进行电穿孔,控制电压为100-500V,电容为300-700μF进行电击,然后在35-40℃下孵育0.5-2h后,将混合液在80000-120000g,4℃条件下离心20-40min,收集沉淀颗粒,即得到微藻外泌体-岩藻黄素复合纳米颗粒,其中所述的岩藻黄素乙醇溶液的制备方法如下:将岩藻黄素溶解于95%乙醇中,磁力搅拌器搅拌使其完全溶解,得到浓度为5mgmL的岩藻黄素乙醇溶液,所述的微藻外泌体溶液的制备制方法如下:将经培养得到的小球藻藻液,采用差速离心法在4℃条件下依次以200-400g离心8-12min,1500-2500g离心15-25min,8,000-12000g离心25-35min以去除细胞与细胞碎片,取上清过0.22μm水系滤膜后再以80,000-1200,000g超速离心80-100min,取沉淀用无菌PBS缓冲液重悬,得到蛋白终浓度为1mgmL的微藻外泌体溶液,所述的小球藻采用异养模式培养,具体如下:将单藻落的ChlorellaspFACHB-9接种于200mL改良Endo培养基中在25℃、120rpm的摇床中培养6-8天,接着将种子液继续接种于600mL改良Endo培养基中在25℃、120rpm的摇床中培养5-6天,收集小球藻FACHB-9藻液,其中改良Endo培养基的配方如下:28gL葡萄糖、1.2gL磷酸二氢钾、4.8gL尿素、1.2gL硫酸镁、105mgL二水氯化钙、16gL七水硫酸亚铁、2.1mgL乙二胺四乙酸二钠、0.2gL柠檬酸三钠、2.86mgL硼酸、0.222mgL七水硫酸锌、1.81mgL四水氯化锰、0.025mgL钼酸钠、0.07mgL五水硫酸铜和1.2mgL六水硝酸钴,所述的电转缓冲液的配方如下:1.15mM磷酸二氢钾,25mM氯化钾,1.46M蔗糖,pH7.2。
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