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龙图腾网获悉苏州大学申请的专利一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114839280B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210291094.7，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法是由杨霜;蒋军红;高子媛;徐明明;葛威设计研发完成，并于2022-03-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法，包括步骤：提取得到蛋白质，然后将蛋白水解得到多肽和糖肽，接着用糖苷内切酶处理，包括①将肽段用糖苷内切酶处理，然后将糖肽氧化结合到酰肼树脂上，通过岩藻糖糖苷酶水解后获取岩藻糖糖基化位点或去岩藻糖糖肽；②将糖肽用糖苷内切酶处理，再使用亲水相互作用色谱得到完整岩藻糖糖肽。也可将糖蛋白或者酶切糖肽，经氧化和与酰肼结合，酶切得到支链α1,3‑岩藻糖糖肽。最后用质谱对岩藻糖肽和含有岩藻糖基化位点的肽段进行分析。本方法对发现疾病细胞、临床组织和人体体液标本中具有岩藻糖基化的疾病标志物，以及疾病早期诊断和预后标志物的研究等方面有着重要意义。

本发明授权一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法，其特征在于，包括步骤： 1唾液蛋白、细胞蛋白或组织蛋白的提取； 2蛋白多肽和糖肽制备； 3核心岩藻糖基化糖蛋白富集或支链岩藻糖基化糖蛋白富集： 所述核心岩藻糖基化糖蛋白富集包括： aEndoM酶切：向纯化后的多肽样品中加入NH4HCO3缓冲液和EndoM酶，孵育过夜，真空冷冻干燥，获得样品； b亲水相互作用色谱： ①将所述样品溶解于含有TFA的ACN中； ②将所述样品加入预先处理的Amide-80色谱柱中，重复操作多次； ③使用含有TFA的ACN清洗萃取柱多次； ④使用60%含有0.1%TFA的ACN、40%含有0.1%TFA的ACN和0.1%TFA依次洗脱样品，并收集洗脱液； ⑤将所述洗脱液合并，真空冷冻干燥，获得核心岩藻糖基化糖肽； 所述支链岩藻糖基化糖蛋白富集包括： aa1-2,4,6岩藻糖苷酶切：向所述纯化后的多肽样品中加入GlycoBuffer1缓冲液，再加入a1-2,4,6岩藻糖苷酶O和半乳糖苷酶的混合酶，孵育过夜，获得混合物； b糖肽氧化和固相结合： ①向所述混合物中加入高碘酸钠避光反应，获得氧化后的样本； ②向所述样本中加入TFA； ③用C18柱子纯化所述样本，获得纯化后的样本； ④取酰肼树脂加入至离心管中，再加入去离子水预处理，去掉过滤液，重复操作两次，获得处理后的酰肼树脂； ⑤将所述纯化后的样本与所述处理后的酰肼树脂反应，获得样品； c岩藻糖苷酶酶切：向所述样品中加入Tris-HCl，再加入a1-2,3,4岩藻糖糖苷酶，孵育后，涡旋离心并收集液体，再使用含有TFA的ACN洗脱多次并收集液体，将收集的液体合并，真空冷冻干燥样品，获得支链岩藻糖糖基化糖肽； 4质谱分析。

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