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龙图腾网获悉浙江工业大学申请的专利高表达DNase I的重组毕赤酵母菌、构建方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116179379B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210791988.2，技术领域涉及：C12N1/19；该发明授权高表达DNase I的重组毕赤酵母菌、构建方法及应用是由薛亚平;沈其;郑裕国设计研发完成，并于2022-07-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本高表达DNase I的重组毕赤酵母菌、构建方法及应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种高表达DNaseI的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用。本发明DNaseI的表达系统，包括宿主细胞和转化入宿主细胞的表达载体，所述表达载体包括插入有DNaseI的第一表达载体和插入有分子伴侣的第二表达载体，所述宿主细胞为毕赤酵母GS115。本发明的有益效果主要体现在：1DNaseI酶可以降解宿主的DNA，因此对表达宿主有一定的毒性。毕赤酵母可以采用分泌表达的形式将合成的DNaseI蛋白运输到胞外，减少DNaseI对宿主的毒性，从而提高DNaseI的体积表达量。2毕赤酵母本身分泌的蛋白比较少，因此如果目的蛋白能有效表达，下游纯化过程将会较为简单。3采用PCI共表达的方法，显著提高了DNaseI的产率，由于PCI采用胞内表达的形式，不会被分泌到胞内，因此不会影响培养基中DNaseI蛋白的纯化步骤。

本发明授权高表达DNase I的重组毕赤酵母菌、构建方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种高表达DNaseI的重组毕赤酵母菌，由如下方法构建获得： （1）合成序列如SEQIDNO.1所示的表达DNaseI的基因序列，并将该序列插入到pPICZαB的MFα序列下游，得到pPICZαB-DNaseI质粒； （2）以毕赤酵母GS115基因组为模板，PCR得到编码ILP信号肽的基因序列，并替换步骤（1）pPICZαB-DNaseI质粒中的MFα基因序列，得到pPICILP-DNaseI质粒；所述编码ILP信号肽的基因序列如SEQIDNO.4所示； （3）将步骤（2）得到的质粒线性化后转到表达宿主毕赤酵母GS115中，转化了的细胞在含有800ugmlZeocin的平板上筛选单克隆； （4）根据毕赤酵母基因组序列，PCR得到编码PCI的基因并插入pPIC3.5K质粒，得到pPIC3.5K-PCI载体；所述编码PCI的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示； （5）将pPIC3.5K-PCI载体用BspEI线性化后电转入步骤（3）得到的单克隆中，转化后的细胞涂布到RDB平板上筛选单克隆，得到所述高表达DNaseI的重组毕赤酵母菌。

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