江南大学史劲松获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118995554B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411257100.2，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用是由史劲松;汪子凯;龚劲松;江佳宇;陆震鸣;许正宏;苏畅;李恒设计研发完成，并于2024-09-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用。本发明从3个方面系统地优化了大肠杆菌的整合表达系统。首先，从大肠杆菌基因组ORI区域的18个位点中筛选出表达活性最高的整合位点slmA；其次，鉴定了大肠杆菌中的16个内源启动子并将其与T7启动子相结合构建多启动子；随后，在底盘细胞水平上优化了T7RNA聚合酶的表达。得到的组成型高效整合表达体系与质粒型重组表达方式相比，GFP表达量提升至2倍左右。最后，将其应用于腈水解酶和透明质酸酶的整合表达，实现了稳定高效的酶表达，酶活与质粒水平相当。总之，本发明提供了一种稳定高效的基因表达方法，无需抗生素和诱导剂，使其成为合成生物学、酶工程和相关应用的有力工具。
本发明授权一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用在权利要求书中公布了：1.一种整合表达目的基因的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌包括以下改造：在大肠杆菌宿主基因组的slmA位点整合目的基因表达框，并将基因组上T7RNA聚合酶编码基因的调控原件进行替换； 所述目的基因表达框中含有目的基因以及启动所述目的基因表达的第一启动子，所述第一启动子为串联启动子，所述串联启动子选自Plpp-T7启动子、PgapA-T7启动子、PssrA-T7启动子、PgapA-Plpp-T7启动子、PgapA-PssrA-T7启动子、Plpp-PgapA-T7启动子、Plpp-PssrA-T7启动子、PssrA-PgapA-T7启动子或PssrA-Plpp-T7启动子； 所述调控原件包括位于T7RNA聚合酶编码基因上游的乳糖操纵子，将所述调控原件替换为含有第二启动子的原件，所述第二启动子选自PalsR启动子或PasnB启动子。
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