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龙图腾网获悉中国人民解放军总医院第二医学中心申请的专利通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119320751B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411537115.4，技术领域涉及：C12N5/079；该发明授权通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法是由张倪惠;张永一;彭楠;曹梦宇;徐率轩;徐创;刘金炜;叶钰;王芳;张震;张潇潇;常晟浩设计研发完成，并于2024-10-31向国家知识产权局提交的专利申请。

本通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法，属于生物技术领域。通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法，包括以下步骤：S1：提取间充质干细胞；S2：将获取的间充质干细胞冻存存放；‌S3：取出无损取样冻存管：S4：用MSC培养基培养至铺满培养皿；S5：分离单个核细胞；S6：得到神经干细胞样细胞：S7：得到分化的神经细胞。本发明解决了现有技术培养的间充质干细胞会降低间充质干细胞的免疫调节能力，影响其在免疫相关疾病治疗中的应用的问题，本发明能够促进细胞的增殖和分化，提高间充质干细胞的免疫调节能力。

本发明授权通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法在权利要求书中公布了：1.通过外泌体miRNA调控靶基因促进间充质干细胞神经向分化的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1：提取间充质干细胞； S2：将获取的间充质干细胞置入无损取样冻存管后，放入冻存复苏盒内进行冻存，最后转移到液氮中冻存存放； S3：使用冻存复苏盒将间充质干细胞复苏后，取出无损取样冻存管，检测细胞活性； S4：取细胞活性大于80％的复苏间充质细胞进行培养，将间充质干细胞用MSC培养基培养至铺满培养皿； S5：将培养皿上的间充质干细胞进行消化处理后，利用Percoll分离液，分离单个核细胞； S6：改良细胞培养基并对外泌体miRNA进行纯化，将纯化的外泌体miRNA溶液加入改良后的细胞培养基进行间充质干细胞纯化和扩增培养，培养3天，得到神经干细胞样细胞，在改良后的细胞培养基中培养时，采用间歇式低氧气氛培养工艺：具体为，先空气气氛中培养4-10h，再在10%CO2含量的空气气氛中培养20-40h，再在5%CO2含量的空气气氛中培养15-30h，最后在空气气氛中培养4-10h； S7：将神经干细胞样细胞转移到MesenCult培养基中继续培养7-14天，得到分化的神经细胞； 所述外泌体miRNA溶液的生物标志物为：hsa-miR-652-3p、hsa-miR-30e-5p或hsa-miR-185-5p； 所述对外泌体miRNA进行纯化，具体包括： 样品准备‌：将血清样品转入离心管，离心后取上清； ‌磁珠准备‌：取出试剂盒中的磁珠，洗涤后加入样品； ‌孵育‌：将磁珠与样品混合孵育； ‌磁珠收集‌：通过离心和磁力架聚集磁珠，弃去上清； ‌外泌体洗脱‌：使用缓冲液洗脱外泌体，收集的洗脱液即为纯化的外泌体miRNA溶液； 所述改良后的细胞培养基的成分包括人参皂苷Rg1、三七多糖、维生素C、EGF和葡萄籽提取物。

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