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龙图腾网获悉湖南大学申请的专利一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119274645B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411553271.X，技术领域涉及：G16B15/30；该发明授权一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法是由丁宁;张英杰;贾桂云;胡新宇设计研发完成，并于2024-11-01向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法在说明书摘要公布了：一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法，包括：（1）筛选结直肠癌疾病靶点；（2）检索天马Ⅲ号方的药物组成，得天马Ⅲ号方有效活性成分靶点；（3）取交集，得交集靶点；（4）构建“成分‑靶点‑疾病”共表达网络图及多个蛋白蛋白相互作用网络图，得潜在核心靶点；交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析；潜在核心靶点与关键化合物分子进行分子对接；体外实验验证天马Ⅲ号方抑制结直肠癌细胞增殖以及促进凋亡；实时荧光定量法验证天马Ⅲ号方对潜在核心靶点mRNA表达水平的影响。本发明方法分析系统全面，误差少，预测速度和效率高，降低药物筛选、开发成本，为结直肠癌的防治提供科学依据，给其它复方的研究提供参考价值。

本发明授权一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法在权利要求书中公布了：1.一种天马Ⅲ号方治疗结直肠癌作用机制的分析方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）先分别从多个数据库中筛选结直肠癌疾病靶点，再删除上述多个数据库所得结直肠癌疾病靶点的重复值，得筛选的结直肠癌疾病靶点； 所述数据库包括：TCGA、GEO、GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD和DisGeNET；所述TCGA数据库的筛选方法为：从TCGA数据库下载结直肠癌RNA患者测序数据，使用Perl脚本对转录组数据进行处理，并将其转换为基因符号，并提取mRNA数据，进一步以Log|FC|≥1，adjP≤0.05为筛选条件，通过R语言分析，得差异表达疾病靶点；所述GEO数据库的筛选方法为：在GEO数据库中，以结肠癌“colorectalcancer”为检索词，获取GSE37364数据集，下载正常癌旁组织和肿瘤组织的基因表达数据，进一步通过Perl软件分组、R语言分析时，以Log|FC|≥1，adjP≤0.05为筛选条件，得结肠癌患者组织中的差异表达基因，将其中的上调基因和下调基因作为GEO的潜在疾病靶点； （2）先通过多个数据库检索天马Ⅲ号方的药物组成，分别得有效活性成分及其靶点，再整合删除上述多个数据库所得有效活性成分及其靶点的重复值，得天马Ⅲ号方有效活性成分靶点； （3）将步骤（1）所得筛选的结直肠癌疾病靶点与步骤（2）所得天马Ⅲ号方有效活性成分靶点取交集，得交集靶点； （4）构建步骤（1）所得结直肠癌疾病靶点与步骤（2）所得天马Ⅲ号方活性成分及其靶点的天马Ⅲ号方治疗结直肠癌的“成分-靶点-疾病”共表达网络图，得共表达靶点；将所述共表达靶点进行蛋白-蛋白互作分析，得多个蛋白蛋白间相互作用网络图，进一步使用插件分析，得天马Ⅲ号方治疗结直肠癌的潜在核心靶点； 所述构建是指：通过Perl脚本将天马Ⅲ号方有效活性成分及其靶点和结直肠癌疾病靶点整合分类为基因组、类型组和网络关系文件，并将上述分组采用Cytoscape软件进行整合；将所述共表达靶点通过STING数据库，设置条件中物种信息选择人类，隐藏未连接的节点，进行蛋白-蛋白互作分析；使用Cytoscape软件的cytoHubba插件分析；取中心性Degree分析排名的前5位作为潜在核心靶点； 分析方法一：先将步骤（3）所得交集靶点进行靶点ID转化，再将转化后的ID进行GO和KEGG通路富集分析，进一步将KEGG富集网络关系进行可视化分析； 分析方法二：将步骤（4）所得潜在核心靶点的3D结构与关键化合物分子进行分子对接，并将对接结果可视化； 分析方法三：采用体外实验验证天马Ⅲ号方抑制结直肠癌细胞增殖以及促进结直肠癌细胞凋亡的情况；采用CCK8法验证天马Ⅲ号方抑制结直肠癌细胞增殖的情况；采用流式细胞术验证天马Ⅲ号方促进结直肠癌细胞凋亡的情况； 分析方法四：采用实时荧光定量法验证天马Ⅲ号方对步骤（4）所得潜在核心靶点mRNA表达水平的影响。

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