中国水产科学研究院南海水产研究所;广州市第一人民医院(广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院)李运东获国家专利权
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龙图腾网获悉中国水产科学研究院南海水产研究所;广州市第一人民医院(广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院)申请的专利一种用于水产动物基因编辑的纳米载体及基因编辑方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119286942B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411826906.9,技术领域涉及:C12N15/873;该发明授权一种用于水产动物基因编辑的纳米载体及基因编辑方法是由李运东;曹紫洋;黄圣设计研发完成,并于2024-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于水产动物基因编辑的纳米载体及基因编辑方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于水产动物基因编辑的纳米载体,包括aTNP纳米颗粒以及bCas9mRNA和sgRNA。还公开了所述TNP纳米颗粒作为mRNA递送载体的应用,以及基于所述纳米载体的基因编辑方法,该方法通过使用生物相容性良好的TNP纳米粒子封装Cas9mRNA和sgRNA,实现了一种高效且低损伤的基因编辑递送方式。该纳米载体通过非侵入式递送到水产动物的胚胎中,优化了转染效率和基因编辑的特异性。此外,该方法可以提高基因编辑效率和精度、增强胚胎存活率,且操作简便和安全,适用性广泛,还可以支持定制化基因编辑,有助于推动基因编辑在水产种质遗传改良中的应用。
本发明授权一种用于水产动物基因编辑的纳米载体及基因编辑方法在权利要求书中公布了:1.一种用于水产动物基因编辑的纳米载体,其特征在于,包括aTNP纳米颗粒以及bCas9mRNA和sgRNA; 所述a中的TNP纳米颗粒通过以下方法制备获得: 1取马来酰亚胺化聚乙二醇Mal-PEG-OH和丙交酯D,L-LA以及乙交酯GA加入反应容器中,加入磁子并且在油浴中加热至130~150℃,持续搅拌直至反应容器中固体全部溶解,随后,在搅拌条件下滴加异辛酸亚锡SnOct2后继续搅拌反应2~5h,反应完毕浓缩产物沉淀在甲醇-乙醚混合液中,抽滤干燥得淡黄色Mal-PEG-b-PLGA; 2取Mal-PEG-b-PLGA加入圆底容器中,再加入搅拌磁子和二甲基亚砜DMSO溶解Mal-PEG-b-PLGA,然后在搅拌条件下加入超纯水并继续搅拌,制备得Mal-NP纳米颗粒; 3将Mal-NP纳米颗粒在超纯水中透析过夜除去二甲基亚砜DMSO,收集透析袋内的纳米颗粒溶液转移至圆底容器中,加入穿膜肽TAT在氮气保护下搅拌反应,反应结束后,收集颗粒溶液离心,收集下层颗粒沉淀,冻干后得到TAT修饰的TAT-Mal-NP材料,简称TNP纳米颗粒; 步骤1中所述马来酰亚胺化聚乙二醇Mal-PEG-OH、丙交酯D,L-LA与乙交酯GA的摩尔比为0.2:10.8~11.5:5.0~5.2; 步骤3中所述Mal-NP纳米颗粒与所述穿膜肽TAT的质量份配比为14~16:1.5~2.5; 步骤3中所述TNP纳米颗粒的平均粒径范围为50~200纳米; 将Cas9mRNA和sgRNA的超纯水溶液与TNP纳米颗粒和DOTAP混合,经过两次超声过程制备得到用于水产动物基因编辑的纳米载体。
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