恭喜浙江海隆生物科技有限公司张强获国家专利权
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龙图腾网恭喜浙江海隆生物科技有限公司申请的专利重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115073559B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110289634.3,技术领域涉及:C07K14/01;该发明授权重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法和应用是由张强;钱泓;吴有强;贾宝琴;徐玉兰;闻雪设计研发完成,并于2021-03-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法和应用,其氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,所述原核可溶性表达方法包括:1根据大肠杆菌密码子偏嗜性特征,人工优化并合成非洲猪瘟病毒EP153R蛋白编码基因,所述氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,基因序列如SEQIDNO.1所示;2将密码子优化后的非洲猪瘟病毒EP153R蛋白的基因如SEQIDNO.1所示的编码基因序列克隆到原核表达载体中,得到含有非洲猪瘟病毒EP153R亚单位蛋白编码基因的重组质粒;3EP153R亚单位跨膜蛋白表达与纯化。本发明能够提供一种可大规模工业化生产的非洲猪瘟跨膜蛋白EP153R亚单位蛋白且制备方法简单、成本低能够达到国家现有标准。
本发明授权重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种重组的非洲猪瘟病毒EP153R亚单位跨膜蛋白的原核可溶性表达方法,其特征在于,所述原核可溶性表达方法包括如下步骤: 1根据大肠杆菌密码子偏嗜性特征,人工优化并合成非洲猪瘟病毒EP153R蛋白编码基因,氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,基因序列如SEQIDNO.1所示; 2将密码子优化后的如SEQIDNO.1所示的非洲猪瘟病毒EP153R蛋白编码基因序列克隆到原核表达载体pET28a中,得到含有非洲猪瘟病毒EP153R亚单位蛋白编码基因的重组质粒; 3EP153R亚单位跨膜蛋白表达与纯化: 将步骤2中筛选的所述重组质粒转入大肠杆菌菌株中诱导表达,通过培养、筛选得到高度表达的菌株,发酵培养该高度表达的菌株,再进行裂解、离心,将离心收集的上清液加入到镍柱中进行分离纯化,最后加入咪唑洗脱液洗脱目的蛋白,以得到含有EP153R蛋白的咪唑洗脱液,再采用磷酸盐缓冲液置换该含有EP153R蛋白的咪唑洗脱液,以得到非洲猪瘟病毒EP153R亚单位可溶性融合蛋白。
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