山东大学陈聪聪获国家专利权
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龙图腾网获悉山东大学申请的专利一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119351496B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411895978.9,技术领域涉及:C12P19/04;该发明授权一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法是由陈聪聪;凌沛学;刘茂祥;王帅帅设计研发完成,并于2024-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法在说明书摘要公布了:本发明属于糖类物质合成技术领域,涉及一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法。该方法包括利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1‑4糖苷键偶联到乳糖或其修饰物上形成含有Pk抗原的三糖;将三氟乙酰氨基半乳糖以β1‑4糖苷键偶联到含有Pk抗原的三糖上形成四糖化合物P‑TFA;碱性条件下脱去三氟乙酰氨基半乳糖上的TFA基团,形成四糖化合物P‑NH2;将半乳糖以α1‑4糖苷键偶联到四糖化合物P‑NH2上形成五糖化合物NOR1‑NH2;将五糖化合物NOR1‑NH2上的氨基变为乙酰氨基,形成五糖化合物NOR1。本发明通过NH2与NHAc的互换,实现NOR1五糖的合成,步骤简单,总体收率高,可大批量合成。
本发明授权一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法在权利要求书中公布了:1.一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法,其特征在于,包括:利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到乳糖或其修饰物上形成含有Pk抗原的三糖;“一锅多酶”体系将三氟乙酰氨基半乳糖以β1-3糖苷键偶联到含有Pk抗原的三糖上形成四糖化合物P-TFA;碱性条件下脱去三氟乙酰氨基半乳糖上的TFA基团,形成四糖化合物P-NH2;利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到四糖化合物P-NH2上形成五糖化合物NOR1-NH2;将五糖化合物NOR1-NH2上的氨基变为乙酰氨基,形成五糖化合物NOR1;其中:所述乳糖或其修饰物的结构式为:合成三糖的反应中,所用到的“一锅多酶”体系包含半乳糖激酶、糖核苷生成酶和α1-4半乳糖基转移酶; 合成四糖的反应中,所用到的“一锅多酶”体系包含N-乙酰氨基葡萄糖激酶和N-乙酰葡糖胺-1-P尿苷转移酶和β-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶;四糖的合成方法为:将含有Pk抗原的三糖与1.0-3.0当量三氟乙酰氨基半乳糖、1.2-4.0当量腺嘌呤核苷三磷酸、1.2-4.0当量尿嘧啶核苷三磷酸、5-150mMMgCl2、100-600mMpH6-8的Tris-HCl缓冲液配制水溶液,将反应体系pH调6.0-7.0之间,然后添加N-乙酰氨基葡萄糖激酶和N-乙酰葡糖胺-1-P尿苷转移酶,反应一小时后加入β-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶,反应时间为48小时,待反应完全后,纯化即可得到四糖化合物P-TFA;反应路线为: 合成五糖的反应中,所用到的“一锅多酶”体系包含半乳糖激酶、糖核苷生成酶和α1-4半乳糖基转移酶。
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