太原理工大学陈景东获国家专利权
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龙图腾网获悉太原理工大学申请的专利一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116008533B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211680144.7,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法是由陈景东;张兵;汪小松;王文杰;刘香莲;刘绍鼎设计研发完成,并于2022-12-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法在说明书摘要公布了:一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法,属于生物分子检测方法领域,步骤如下:氯化铁溶液加入叶绿体溶液;调pH;离心处理收集沉淀;洗涤,离心处理,收集沉淀;加捕获抗体;离心处理,收集沉淀;洗掉未被捕获的捕获抗体;加入封闭液;洗涤,离心处理,收集沉淀;加待检测生物分子;离心处理,收集沉淀;洗掉未反应的待检测生物分子;加检测抗体;离心处理,收集沉淀;洗掉未反应的检测抗体;加标有酶的链霉亲和素;离心处理,收集沉淀;洗掉未交联的链霉亲和素;加化学荧光底物;加终止液,检测溶液吸光度。本发明解决了现有方法制备的金纳米粒子不能直接应用到ELISA中,需要进一步生物化学表面修饰的问题。
本发明授权一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法在权利要求书中公布了:1.一种绿色制备免修饰的表面等离激元增强型生物分子检测方法,其特征在于:包括如下步骤: 步骤S1:将1mL浓度为10mM的氯金酸溶液加入到1g植物绿色叶子制备的10mL叶绿体溶液中,搅拌至混合均匀; 步骤S2:加入NaOH溶液,将溶液pH值调至7.5-9,搅拌,等待氯金酸和叶绿体反应; 步骤S3:将溶液注入离心管中,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S4:将超纯水注入离心管中对沉淀进行洗涤后,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀,这一洗涤过程反复1-5次,得到金纳米粒子; 步骤S5:洗涤完成后,向步骤S4中的沉淀中加入待检测生物分子IL-6对应的小鼠抗人IL-6捕获抗体,对金纳米粒子和待检测生物分子IL-6对应的小鼠抗人IL-6捕获抗体溶液充分搅拌反应; 步骤S6:利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S7:将洗涤液加入离心管中,搅拌,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,洗涤掉未被金纳米粒子捕获的小鼠抗人IL-6捕获抗体,收集沉淀; 步骤S8:向步骤S7中的沉淀中加入封闭液,进行孵化; 步骤S9:将洗涤液加入离心管中,搅拌洗涤,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S10:向步骤S9中的沉淀中加入待检测生物分子IL-6,等待至小鼠抗人IL-6捕获抗体和待检测生物分子IL-6充分反应; 步骤S11:利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S12:将洗涤液加入离心管中,搅拌,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,洗涤掉未反应的待检测生物分子IL-6,收集沉淀; 步骤S13:向步骤S12中的沉淀中加入生物素化山羊抗人IL-6检测抗体,等待至待检测生物分子IL-6和生物素化山羊抗人IL-6检测抗体充分反应; 步骤S14:利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S15:将洗涤液加入离心管中,搅拌,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,洗涤掉未反应的生物素化山羊抗人IL-6检测抗体,收集沉淀; 步骤S16:向步骤S15中的沉淀中加入标有酶的链霉亲和素,等待至检测抗体和链霉亲和素相交联; 步骤S17:利用离心机进行离心处理后,去除上清液,收集沉淀; 步骤S18:将洗涤液加入离心管中,搅拌,利用离心机进行离心处理后,去除上清液,洗涤掉未交联的链霉亲和素,收集沉淀; 步骤S19:向步骤S18中的沉淀中加入化学荧光底物,等待至酶和化学荧光底物进行反应生成荧光产物; 步骤S20:加入终止液,检测溶液的吸光度以计算待测生物分子浓度。
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