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龙图腾网获悉浙江大学医学院附属第二医院;中国人民解放军西藏军区总医院;张可欣申请的专利一种用于艰难梭菌感染检测的环状DNA模板前体及其制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117535431B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311469941.5，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权一种用于艰难梭菌感染检测的环状DNA模板前体及其制备方法和应用是由夏安越;徐欢;张可欣;冯东方设计研发完成，并于2023-11-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于艰难梭菌感染检测的环状DNA模板前体及其制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种用于艰难梭菌检测的环状DNA模板前体及其制备方法及其应用，所述环状DNA模板前体包括采用H1、H2发卡探针和触发链Trigger构成的反应体系进行三维自组装反应；所述三维自组装反应包括Trigger触发H1发夹结构，形成TH1中间体，H1发夹结构被展开，并与H2结合产生H1H2结构，H2的DNA模板环化，得到环状DNA模板前体；当艰难杆菌毒素存在时能够使触发链Trigger再次释放，能够连续催化所述H1DNA发卡探针的发夹结构而不被消耗。采用本发明的技术方案，通过三维自组装‑扩增反应及银增强金纳米实现信号的级联三级放大，从而实现艰难梭菌感染的高灵敏、高特异检测。

本发明授权一种用于艰难梭菌感染检测的环状DNA模板前体及其制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种艰难梭菌的检测方法，其特征在于，包括以从人粪便提取的DNA为模板，与H1DNA发卡探针、H2DNA发卡探针和触发链Trigger构成的反应体系以及特异性引物、金纳米颗粒和PCR反应试剂进行扩增反应，通过是否合成得到DNA水凝胶进行判断阳性或阴性； 若成功合成得到所述DNA水凝胶，则待测样本为阳性；若不能合成得到所述DNA水凝胶，则待测样本即为阴性； 所述检测方法为非诊断目的； H1DNA发卡探针、H2DNA发卡探针和触发链Trigger构成的反应体系进行三维自组装反应； 所述三维自组装反应包括所述触发链Trigger触发所述H1DNA发卡探针，并打开H1DNA发卡探针序列的发夹结构并形成TH1中间体，所述H1DNA发卡探针的发夹结构被展开，并与H2DNA发卡探针序列进行结合产生H1H2结构，使得所述H2DNA发卡探针的DNA模板环化，得到环状DNA模板前体；所述触发链Trigger序列可以再次被释放；释放的所述触发链Trigger能够连续催化所述H1DNA发卡探针的发夹结构，并与之相互作用而不被消耗； 所述触发链Trigger序列根据艰难梭菌释放的毒素的适配体完全互补配对设计获得； 所述触发链Trigger的序列如SEQIDNO.1所示； 所述H1DNA发卡探针的序列如SEQIDNO.2所示； 所述H2DNA发卡探针的序列如SEQIDNO.3所示； 所述毒素的适配体的序列如SEQIDNO.7所示； 所述H1DNA发卡探针、所述H2DNA发卡探针和所述触发链Trigger的添加的体积比为1:1:1； 具体步骤包括： 配置扩增反应体系，包括特异性引物、金纳米颗粒和环状DNA模板前体以及PCR反应试剂； 所述特异性引物包括第一特异性引物、第二特异性引物和第三特异性引物； 所述第一特异性引物、所述第二特异性引物和所述第三特异性引物的序列分别如SEQIDNO.4-6所示； 将所述环状DNA模板前体和第一特异性引物、金纳米颗粒和PCR反应试剂进行第一次孵育后，加入第二特异性引物和第三特异性引物进行扩增反应后，反应结束后进行第二次孵育，终止反应，若反应产物为所述DNA水凝胶，则判断为阳性； 所述第一次孵育的条件包括30℃孵育2小时； 所述第二次孵育的条件包括65℃孵育10min； 所述环状DNA模板前体、所述第一特异性引物、所述第二特异性引物和所述第三特异性引物的添加的体积比为6:2:1:1； 所述PCR反应试剂包括phi29聚合酶反应缓冲液、BSA、dNTP、T4连接酶、phi29聚合酶和DEPC水。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人浙江大学医学院附属第二医院;中国人民解放军西藏军区总医院;张可欣，其通讯地址为：310000 浙江省杭州市上城区解放路88号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。