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龙图腾网恭喜西安医学院申请的专利用于温和检测5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒及其检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115961003B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211440540.2，技术领域涉及：C12Q1/6858；该发明授权用于温和检测5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒及其检测方法是由张臻昊;祁艳;戴雨轩;劳可静;陈鹏;苟兴春设计研发完成，并于2022-11-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本用于温和检测5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒及其检测方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种用于温和检测5hmC的试剂盒及其检测方法，所述试剂盒包括：封闭反应液、APOBEC脱氨基转化液、吡啶硼烷转化液、连接反应液和扩增反应液；所述连接反应液包括探针A和探针B。本发明首先应用葡糖转移酶将二磷酸尿苷‑葡萄糖（UDP‑Glu）修饰在5hmC的羟基上形成5gmc，保护5hmC不被后续反应影响，之后应用APOBEC对C和5mC进行脱氨基转化为尿嘧啶（U），再通过吡啶硼烷将5fC和5caC转化为二氢尿嘧啶（DHU），U与DHU与A碱基互补配对，而5gmc依然与G配对，从而5hmC与其他碱基形成单碱基差异。采用基于连接的环介导等温扩增（LAMP）高灵敏检测5hmC。本发明的检测方法温和高效，能检测低至2fM的5hmC，特异性达到1%。

本发明授权用于温和检测5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒及其检测方法在权利要求书中公布了：1.一种用于检测5hmC的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：封闭反应液、APOBEC脱氨基转化液、吡啶硼烷转化液、连接反应液和LAMP反应混液；所述连接反应液包括探针A、探针B；所述探针A的序列如SEQIDNO:1所示；所述探针B的序列如SEQIDNO:2所示； 所述试剂盒中封闭反应液包括10×cutsmart缓冲液1μL，50×UDP-Glu1μL，以及10U噬菌体β-葡萄糖基转移酶1μL，去离子水2μL，总体积5μl； 所述APOBEC脱氨基转化液包括APOBEC脱氨酶0.2μL，10×APOBEC脱氨基缓冲液1μL，牛血清白蛋白0.1μL，总体积1.3μL； 所述吡啶硼烷转化液包括600mM的pH=4.3的醋酸钠溶液1μL和1M吡啶硼烷0.1μL，总体积1.1μL； 所述连接反应液包括20nM的探针A1μL，20nM的探针B1μL，5U的Amp连接酶0.2μL，10×Amp连接酶缓冲溶液1μL和去离子水5.8μL，总体积9μL。

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