恭喜苏州依科赛生物科技股份有限公司于宝利获国家专利权
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龙图腾网恭喜苏州依科赛生物科技股份有限公司申请的专利一种真核细胞的电转染方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115927465B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211673767.1,技术领域涉及:C12N15/85;该发明授权一种真核细胞的电转染方法是由于宝利;孙芳;陈旭;陈刚;韩向宗;商春华;牛馨钰设计研发完成,并于2022-12-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种真核细胞的电转染方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种真核细胞的电转染方法。该转染方法包括以下步骤:1采用第一缓冲液与核酸片段或含有核酸片段的质粒混合得到转染基因溶液;2将待转染细胞与第二缓冲液混合,静置平衡,离心取沉淀与转染基因溶液混合,静置孵育,重悬;3对重悬后的溶液进行100~300v,80~300μs,1~3次脉冲电击,静置孵育,第一缓冲液和第二缓冲液的pH值分别为7.2±0.2,第一缓冲液的渗透压为230~280mOsmolkg,第二缓冲液的渗透压为280~320mOsmolkg,第一缓冲液的渗透压比第二缓冲液小,且他们分别含有葡萄糖、苏氨酸和或天冬酰胺。本发明可以更好的兼顾细胞转染效率和细胞存活率。
本发明授权一种真核细胞的电转染方法在权利要求书中公布了:1.一种真核细胞的电转染方法,其特征在于,所述的转染方法包括以下步骤: 1采用第一缓冲液与核酸片段或含有核酸片段的质粒混合得到转染基因溶液; 2将待转染细胞与第二缓冲液混合,静置平衡,离心取沉淀,将所述的沉淀和所述的转染基因溶液混合,静置孵育,用移液器轻柔吹打重悬细胞; 3对所述的重悬后的溶液进行电击,电击参数为:100~300v,80~300μs,1~3次脉冲,电击后静置孵育, 其中,所述的第一缓冲液和所述的第二缓冲液的pH值分别独立地为7.2±0.2, 所述的第一缓冲液的渗透压为250~270mOsmolkg,所述的第二缓冲液的渗透压为285~300mOsmolkg, 所述的第一缓冲液的组分包括:2~2.5gL氯化钾,0.05~0.1gL磷酸二氢钾,0.1~0.15gL磷酸氢二钾,28~32gL肌醇,0.8~1.2gL葡萄糖,0.3~0.4gL苏氨酸,0.08~0.12gL天冬酰胺,余量注射水; 所述的第二缓冲液的组分包括:2~2.5gL氯化钾,0.05~0.1gL磷酸二氢钾,0.1~0.15gL磷酸氢二钾,37~40gL肌醇,0.8~1.2gL葡萄糖,0.3~0.4gL苏氨酸,0.08~0.12gL天冬酰胺,余量注射水。
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